2025-08-14 03:22:36
ICSI技術(shù)作為輔助受精的一種手段,在近10年獲得長(zhǎng)足發(fā)展。ICSI技術(shù)在動(dòng)物受精機(jī)理研究、野生動(dòng)物遺傳資源保存、拯救珍稀動(dòng)物和胚胎工廠化生產(chǎn)等方面有著非常廣闊的應(yīng)用前景。該技術(shù)已經(jīng)成為人類(lèi)臨床醫(yī)學(xué)上***男性不育癥的重要手段,并在全世界得到廣泛應(yīng)用。盡管ICSI已取得很大成就,但是其存在的問(wèn)題也不容忽視。首先,由于人為地選擇,動(dòng)物自身對(duì)精子優(yōu)勝劣汰的選擇遭到破壞。這對(duì)動(dòng)物種群的發(fā)展產(chǎn)生的影響還需長(zhǎng)期深入的研究。如果能詳細(xì)了解精子的表型和基因型之間的關(guān)系,相信ICSI技術(shù)的可靠性會(huì)有所明確。其次,作為胚胎生物技術(shù)的一部分。ICSI技術(shù)也存在總體效率低的問(wèn)題,而且胚胎移植后妊娠率低而流產(chǎn)率高亦是目前存在的普遍問(wèn)題。另外,存在出生動(dòng)物的死亡和畸形等不良后果。因此要更深入地研究其機(jī)理和操作等問(wèn)題,進(jìn)一步改善ICSI技術(shù)。比如Piezo-ICSI技術(shù)就可以有效提高成功率。壓電顯微操作器PMM利用壓電元件產(chǎn)生的驅(qū)動(dòng)力來(lái)展示其對(duì)各種樣品的優(yōu)異穿孔能力。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內(nèi)注射
壓電式破膜儀的規(guī)范操作需兼顧樣本**與設(shè)備精確度,以下為標(biāo)準(zhǔn)流程及注意事項(xiàng):一、操作前準(zhǔn)備設(shè)備檢查確認(rèn)電源接地良好,開(kāi)機(jī)預(yù)熱使壓電元件達(dá)到熱穩(wěn)定狀態(tài),觀察屏幕顯示參數(shù);安裝適配探頭,擰緊固定螺帽后輕晃探頭,確保無(wú)松動(dòng)(晃動(dòng)幅度≤0.1mm)。樣本預(yù)處理細(xì)胞樣本需制備成單細(xì)胞懸液,置于無(wú)菌培養(yǎng)皿。二、主要操作流程參數(shù)設(shè)置根據(jù)樣本類(lèi)型調(diào)節(jié)頻率、振幅(1-5μm)及脈沖時(shí)長(zhǎng)(10-50ms),建議先在標(biāo)準(zhǔn)微球上測(cè)試破膜效率(穿孔率≥80%且無(wú)樣本損傷);開(kāi)啟顯微定向系統(tǒng),通過(guò)三維平臺(tái)將探頭頂部對(duì)準(zhǔn)目標(biāo)區(qū)域(距離樣本0.5-1mm)。破膜操作點(diǎn)“單次脈沖”或“連續(xù)模式”(間隔≥1秒),實(shí)時(shí)觀察顯微鏡下破膜效果(細(xì)胞膜出現(xiàn)短暫透光孔即為成功);破碎時(shí)需間歇性操作(每30秒停機(jī)冷卻10秒),避免產(chǎn)熱導(dǎo)致樣本變性,同時(shí)用移液器輕晃懸液,確保破碎均勻。三、**與禁忌操作禁止行為:探頭未接觸樣本時(shí)空載運(yùn)行;用探頭直接觸碰載玻片或培養(yǎng)皿底部;處理強(qiáng)腐蝕性樣本,否則需額外配置防腐蝕探頭及廢液回收裝置。緊急情況處理:若出現(xiàn)異常噪音(超過(guò)60dB)或屏幕報(bào)錯(cuò)(如“振幅超限”),立即按下急停按鈕,斷電后檢查探頭是否卡頓或參數(shù)設(shè)置異常。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內(nèi)注射PMM具備快速響應(yīng)的特點(diǎn),能夠在短時(shí)間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)操作,減少了操作時(shí)間和不確定性。
壓電陶瓷-高聚物復(fù)合材料請(qǐng)?zhí)砑訄D片說(shuō)明無(wú)機(jī)壓電陶瓷和有機(jī)高分子樹(shù)脂構(gòu)成的壓電復(fù)合材料,兼?zhèn)錈o(wú)機(jī)和有機(jī)壓電材料的性能,并能產(chǎn)生兩相都沒(méi)有的特性。因此,可以根據(jù)需要,綜合二相材料的優(yōu)點(diǎn),制作良好性能的換能器和傳感器。它的接收靈敏度很高,比普通壓電陶瓷更適合于水聲換能器。在其它超聲波換能器和傳感器方面,壓電復(fù)合材料也有較大優(yōu)勢(shì)。國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)這個(gè)領(lǐng)域也頗感興趣,做了大量的工藝研究,并在復(fù)合材料的結(jié)構(gòu)和性能方面做了一些有益的基礎(chǔ)研究工作,目前正致力于壓電復(fù)合材料產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)。4、壓電性特異的多元單晶壓電體
PMM6建立在一個(gè)新的、更小的壓電驅(qū)動(dòng)單元之上,該單元提供:壓電池和微量移液器吸頭之間更有效、更溫和的耦合用戶(hù)可調(diào)的驅(qū)動(dòng)力更新后的用戶(hù)界面經(jīng)過(guò)優(yōu)化,易于使用,包括:觸摸屏,便于操作并顯示當(dāng)前程序的設(shè)置3種可編程操作模式–標(biāo)準(zhǔn)、壓電ICSI和**–允許每個(gè)用戶(hù)根據(jù)其特定需求平衡操作簡(jiǎn)單性與精確控制PrimeTech的PMM6具有新的設(shè)計(jì)、特性和功能,可提供:“對(duì)卵母細(xì)胞和操作者都溫和"的精確顯微注射用戶(hù)友好的操作,適合初學(xué)者和**!PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。
傳統(tǒng)的ICSI是通過(guò)授精針刺破卵子,將挑選好的精子注入使之受精。本質(zhì)上對(duì)卵子來(lái)說(shuō)是一種物理性侵入,特別對(duì)于幼弱老化的卵子可能會(huì)有一定損傷的風(fēng)險(xiǎn)。而全新的壓電式胞漿內(nèi)單精子注射(Piezo-ICSI)技術(shù),可以減少對(duì)卵子的傷害,相較于常規(guī)式的ICSI相比更能提高受精率。Piezo-ICSI超音振動(dòng)顯微受精法,采用極細(xì)(0.908毫米)的平口注射針,比常規(guī)的注射針(1.473mm)細(xì)小了將近一半,能夠?qū)⒙殉驳膫档奖容^低。另一方面,精子注射的過(guò)程對(duì)卵子的影響也極其重要。Piezo-ICSI技術(shù)通過(guò)超音振動(dòng)來(lái)打開(kāi)卵子透明帶再將精子注入,減少了對(duì)卵子的損傷,也能夠提高胚胎成功受精的幾率。研究數(shù)據(jù)顯示,以原有的人工授精療法ICSI與Piezo-ICSI進(jìn)行比較,受精率從83.1%提高到90.3%,細(xì)胞**優(yōu)化由84.60%提高到88.10%。PMM 6 MB-D-2中等力度輸出型號(hào),適用于ICSI、ES細(xì)胞注射、活檢操作等。上海細(xì)胞內(nèi)膜打孔壓電核轉(zhuǎn)移
PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內(nèi)注射
Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤(pán);按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,準(zhǔn)備進(jìn)行顯微操作。具體操作前,首先取10枚卵母細(xì)胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合;再將單個(gè)精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開(kāi)頭和尾;連續(xù)剪切5個(gè)精子后,將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細(xì)胞的操作滴中,準(zhǔn)備將精子頭逐個(gè)注射至卵母細(xì)胞質(zhì)中。注射時(shí),從時(shí)鐘9點(diǎn)的方向吸住卵母細(xì)胞,使紡錘體保持在6點(diǎn)或12點(diǎn)的位置,從3點(diǎn)的方向輕輕進(jìn)針,同時(shí)用Piezo脈沖擊穿透明帶,將透明帶碎片吹出注射針的同時(shí),將精子頭吹至針尖處,繼續(xù)進(jìn)針,直至針尖插入卵母細(xì)胞深處,幾乎貼近對(duì)側(cè)質(zhì)膜時(shí),用Piezo弱脈沖擊穿卵母細(xì)胞質(zhì)膜,將精子頭吐出,回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,輕輕退針,完成一次注射。依次操作,盡快實(shí)現(xiàn)該批卵母細(xì)胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進(jìn)行第二批卵母細(xì)胞的精子頭注射,在注射HCG后17h,完成全部卵母細(xì)胞的精子注射。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內(nèi)注射